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動(dòng)植物/菌種GFP表達(dá)觀察常見問題解答

動(dòng)植物/菌種GFP表達(dá)觀察常見問題解答

時(shí)間:2019-7-9 編輯:SunLonge

1.?如何觀察動(dòng)物植物表達(dá)GFP
首先要選擇光線比較暗的環(huán)境,佩戴觀察眼罩,采用深圳熒鴻熒光蛋白觀察鏡照射要觀察的植株,GFP表達(dá)位置即可清晰呈現(xiàn)。

2.觀察到的GFP表達(dá)位置如何拍照?
要拍照植物GFP表達(dá)的位置,首先要有一臺(tái)單反相機(jī),安裝植物拍照濾鏡,路徑和鏡頭要是對(duì)應(yīng)的,如果不對(duì)應(yīng)可在市場(chǎng)上購買濾鏡安裝轉(zhuǎn)換卡,用熒光蛋白觀察鏡照射植物,用裝有濾鏡的單反相機(jī)直接拍照就行了,切記要關(guān)閉照相機(jī)閃光功能。

3.?用熒光蛋白觀察鏡需要把植物葉片采下來觀察嗎?
便攜式熒光蛋白觀察鏡可采用內(nèi)置有充電電池式,即開即用,可以直接帶入到試驗(yàn)田里面觀察,?無需采摘葉片,如果試驗(yàn)田光線太亮,需要做隔光處理。

4.? 365nm、450nm、488nm?用哪個(gè)波段最適合觀察GFP熒光蛋白?
這幾個(gè)波段都能激發(fā)GFP和EGFP出現(xiàn)熒光,365nm激發(fā)的比較弱,488nm激發(fā)的熒光最強(qiáng),但488nm的激發(fā)波長(zhǎng)太接近發(fā)射波長(zhǎng)520nm,激發(fā)光和發(fā)射光距離太近對(duì)觀察眼鏡要求太高,觀察眼鏡很難把發(fā)射光隔離掉,會(huì)嚴(yán)重干擾發(fā)射的熒光。所以用450nm的藍(lán)光激發(fā)光是最理想的。

5.? 365nm的紫外光源照射植物葉片為什么是紅色和黃色?
365nm的紫外光源照射植物葉片,葉片的葉綠素在紫外線作用下會(huì)發(fā)紅光,GFP發(fā)出的是綠色的熒光,紅色和綠色混在一起,會(huì)變成黃色,所有,用紫外光源照射葉片上黃色部位有可能就是GFP表達(dá)的位置。

6.?深圳熒鴻熒光蛋白觀察鏡主要有哪些應(yīng)用?
1)檢測(cè)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白(GFP)基因、紅色熒光蛋白(DsRed)基因植物:水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥等;
2)檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因動(dòng)物:小鼠、兔子、猴子等;
3)檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物:細(xì)菌、真菌、酵母等;
4)檢測(cè)GFP、DsRed基因組織特異性表達(dá)

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