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如何用熒光顯微鏡觀察GFP蛋白

如何用熒光顯微鏡觀察GFP蛋白

時間:2019-7-15 編輯:SunLonge

熒光顯微鏡觀察GFP蛋白研究動植物方便簡單,被眾多學校、研究所廣泛使用,如何使用熒光顯微鏡觀察GFP蛋白也成為初次使用熒光顯微鏡必須掌握的一個知識點。也可采用顯微鏡+激發(fā)光源觀測GFP蛋白,詳見GFP熒光蛋白激發(fā)怎么觀測拍攝,更多問題咨詢0755-89233889.

(1)打開熒光顯微鏡燈源,超高壓汞燈要預熱15min才能達到最亮點(不同廠家的時間會有所不同),LED燈源則不需要預熱

(2)透射式熒光顯微鏡需在光源與暗視野聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應的壓制濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片、雙色束分離器、壓制濾片的插塊。

(3)用低倍鏡觀察,根據不同型號熒光顯微鏡的調節(jié)裝置,調整光源中心,使其位于整個照明光斑的中央。

(4)放置GFP標本片,調焦后即可觀察。使用中應注意:未裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標本時,必須用無熒光的特殊鏡油;高壓汞燈關閉后不能立即重新打開,需待汞燈完全冷卻后才能再啟動,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命,LED燈源的則可隨關隨開

(5)觀察。例如:在熒光顯微鏡下用藍紫光濾光片,觀察到經0.01%吖啶橙熒光染料染色的細胞,細胞核和細胞質被激發(fā)產生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)

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