綠色熒光蛋白GFP收到紫外線或者是藍光激發(fā)時，出現(xiàn)綠色熒光，熒光穩(wěn)定檢測方便，而且熒光受外界影響小，對細胞的傷害小，因此常被廣泛應用于活體報告蛋白。

一般觀察綠色熒光蛋白GFP的方法有

1）激發(fā)光源ULV450觀察

激發(fā)光源ULV450能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光，激發(fā)光源ULV450為藍色光纖，在觀察gfp熒光時，佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號。

2)熒光顯微鏡觀察

熒光顯微鏡是以紫外線為光源，?用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學物質(zhì)的分布及定位等。?細胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。目前在常用的方法就是采用熒光顯微鏡觀察，熒光顯微鏡在實驗室普及，但不足的是必須采集葉片或動物切片進行觀察，對培養(yǎng)的標本進行破壞，無法進行活體觀察。

 

3)紫外光源觀察

采用紫外線燈（又叫黑光燈）觀察也非常方便，但如果觀察植物，植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會發(fā)出熒光，對gfp發(fā)出的熒光也會產(chǎn)生干擾，另外，標本長時間在紫外光源照射下對GFP標本組織也會造成破壞。365nm的紫外線燈照射植物葉片，葉片的葉綠素在紫外線作用下會發(fā)紅光，而GFP熒光蛋白在紫外線激發(fā)下發(fā)出的是510nm青綠色的熒光，紅色和青綠色混在一起，會變成黃色，所以，用紫外光源照射葉片上黃色部位有可能就是GFP表達的位置

 

三種方法中激發(fā)光源是最直接，最方便的，同時效果也很好。激發(fā)光源ULV450為小型手電筒樣式，鋰電池供電，輕巧容易攜帶。根據(jù)GFP的熒光特性，我們可以用激發(fā)光源ULV450檢測轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白（GFP）基因、紅色熒光蛋白（DsRed）；檢測基因植物：水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥；檢測轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因動物：小鼠、兔子、猴子等；檢測轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物：細菌、真菌、酵母等檢測GFP、DsRed基因組織特異性表達；