綠色熒光蛋白GFP吸收的光譜峰值為395nm（紫外），并有一個峰值為470nm的副吸收峰（藍光）；雖然450～490nm只是GFP的副吸收峰，但由于長波能量低，細(xì)胞忍受能力強，更適合活體檢測，因此通常多使用藍光波段光源（多為488nm）。GFP發(fā)射光譜最大峰值為509nm（綠光），并帶有峰值為540nm的側(cè)峰（Shouder）。深圳熒鴻專注熒光蛋白激發(fā)光源研發(fā)，有單波段紫外、藍光激發(fā)光源，也有紫外+藍光雙波長激發(fā)光源，詳情咨詢：0755-89233889！

拓展：

熒光蛋白GFP發(fā)光原理

熒光蛋白發(fā)光類型屬于斯托克斯位移型，其基本原理是生色團在較高能量的光子照射下發(fā)生構(gòu)象的改變，從而導(dǎo)致分子能級變化，從高能級的構(gòu)象躍遷向低能級時發(fā)出較低能量的光子。生色團在發(fā)光過程中主要有兩種化學(xué)過程。一是質(zhì)子轉(zhuǎn)移，即質(zhì)子化和去質(zhì)子化，二是分子構(gòu)象的改變。生色團主要有三種構(gòu)象：A型、B型以 及中間過渡態(tài)Z 型。在分子構(gòu)象變化的同 時還伴隨著氫鍵的生成和斷裂，以及電荷的傳遞去質(zhì)子化和質(zhì)子化的分子構(gòu)象不同， 對應(yīng)的分子能級也不同，從而其發(fā)射光譜中有兩個特征峰，代表兩種躍遷過程。質(zhì)子化構(gòu)象生色基團通過Tyr66 的脫質(zhì)子狀和質(zhì)子化狀態(tài)(酚羥基)的轉(zhuǎn)換決定熒光發(fā)射。由于酚的激發(fā)態(tài)酸性遠(yuǎn)大于其基態(tài), 故僅脫質(zhì)子態(tài)的結(jié)構(gòu)發(fā)射熒光。這個過程是十分迅速的，因此熒光蛋白發(fā)射的是熒光而不是磷光，需要激發(fā)光源持續(xù)存在才可連續(xù)發(fā)光。但是其極快的激發(fā)響應(yīng)使得熒光蛋白適合作為高靈敏度生物探針以及生物成像材料。

熒光蛋白GFP發(fā)光特性

GFP熒光極其穩(wěn)定，在激發(fā)光照射下，GFP抗光漂白（Photobleaching）能力比熒光素強，特別是在450～490nm藍光波長下更穩(wěn)定。在熒光顯微鏡下，GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠(yuǎn)比熒光素標(biāo)記的熒光抗體高，抗光漂白能力強，因此更適用于定量測定與分析。由于GFP熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物，因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報告蛋白，其作用是任何其它酶類報告蛋白無法比擬的。但因為GFP不是酶，熒光信號沒有酶學(xué)放大效果，因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報告蛋白，比如熒光蛋白的應(yīng)用非常的廣泛，已經(jīng)應(yīng)用于分子標(biāo)記，體內(nèi)示蹤，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，藥物篩選等生物科研的各個方面熒光讓我們能夠檢測分子的構(gòu)象變化，也能讓我們追蹤化學(xué)反應(yīng)…. 是科學(xué)研究的重要手段之一。